Article Annexe I de l'Arrêté du 5 avril 1971 relatif aux méthodes officielles d'analyse des cosmétiques et produits de beauté

1. Objet.
La présente méthode est utilisée pour la détermination de l'indice d'irritation primaire cutanée d'un produit cosmétique ou d'hygiène corporelle.
2. Domaine d'application.
La méthode s'applique aux produits ne colorant pas la peau d'une manière indélébile.
3. Principe.
La méthode est fondée sur l'observation des réactions cutanées provoquées par l'application unique du principe.
4. Animaux d'expérience et équipement.
4.1. Lapins albinos mâles, de souche définie, de 2,5 kg environ. Les animaux doivent avoir séjournés dans l'animalerie en cage individuelle, une semaine au minimum afin d'être parfaitement acclimatés et reçoivent, dès leur arrivée, une alimentation de composition constante et équilibrée.
4.2. Dispositif de maintien permettant la bonne réalisation du protocole expérimental.
4.3. Tondeuse électrique pour animal, munie d'un peigne (hauteur de coupe 0,05 mm).
4.4. Vaccinostyles stériles.
4.5. Pièces de gaze hydrophile Codex à 8 épaisseurs d'une surface de 6,2 cm carrés (carrées de 2,5 cm de côté, ou rondes de 2,8 cm de diamètre), dont une des faces est recouverte d'une pellicule adhésive hypoallergénique et imperméable, ou tout système équivalent (par exemple une capsule souple et inerte empêchant la diffusion des liquides très fluides à l'extérieur du pansement).
4.6. Bande de fixation microporeuse adhésive hypoallergénique de largeur 50 mm, ou tout système équivalent non occlusif.
4.7. Compresse de protection en gaze hydrophile Codex de dimensions appropriées.
4.8. Dispositif de maintien souple et aéré des pansements (bande lissée ou sparadrap).
4.9. Seringue stérile de 1 ml au dixième.
4.10. Balance de laboratoire sensible au moins au milligramme.
5. Mode opératoire.
5.1. Préparation de la peau.
5.1.1. La veille de l'application du produit, tondre le dos et les flancs de lapins (4.1.) à la tondeuse (4.3.) pour dégager une surface d'environ 14 cm X 14 cm ; opérer avec précaution de manière à éviter toute irritation. Vérifier l'état de la peau pour ne retenir que six animaux présentant une peau saine et glabre.
5.1.2. Effectuer à la droite de l'axe vertébral, à l'aide d'un vaccinostyle (4.4.), trois scarifications parallèles sur une longueur d'environ 2,5 cm, espacées de 0,5 cm environ. Les scarifications de l'épiderme sont réalisées sans atteindre le derme, c'est-à-dire sans saignement.
5.2. Application du produit :
5.2.1. Appliquer le produit sur la peau (zones scarifiées et non scarifiées), soit directement, soit après l'avoir déposé sur les pièces de gaze, de manière à éviter toute perte, à raison de :
Produits liquides : 0,5 ml.
Produits semi-liquides et pâteux : 0,5 ml ou 0,5 g.
Produits solides et pulvérulents : 0,5 g.
5.2.1.1. Les produits liquides seront déposés, à l'aide de la seringue (4.9.) sur deux pièces de gaze (4.5.) que l'on appliquera immédiatement sur la peau (5.2.1.).
5.2.1.2. Les produits semi-liquides et pâteux seront appliqués directement sur la peau (5.2.1.), puis recouverts des pièces de gaze (4.5.).
5.2.1.3. Les produits solides et pulvérulents seront appliqués sur la peau (5.2.1.), puis recouverts des pièces de gaze (4.5.) préalablement humidifiées par 0,5 ml d'eau distillée ou de qualité équivalente.
5.2.2. Maintenir en contact avec la peau le produit et la pièce de gaze sur chacune des deux zones avec la bande de fixation (4.6.).
5.2.3. Placer la compresse de protection(4.7.).
5.2.4. Maintenir l'ensemble par le dispositif de pansement (4.8.) qui sera précisé dans le compte rendu d'expérimentation.
5.2.5. Enlever le pansement et les pièces de gaze vingt-quatre heures après l'application du produit.
5.3. Evaluation de l'irritation primaire cutanée :
L'irritation primaire cutanée doit être évaluée trente minutes environ après enlèvement du pansement et de nouveau quarante-huit heures plus tard, c'est-à-dire environ soixante-douze heures après l'application du produit. Les observations sont faites sur les deux zones, scarifiée et non scarifiée, selon l'échelle numérique suivante :
5.3.1. Erythème et formation d'escarres :
- Pas d'érythème : 0.
- Léger érythème (à peine visible) : 1.
- Erythème bien visible : 2.
- Erythème important : 3.
- Erythème grave (rouge pourpre) avec ou sans escarres (lésions profondes) : 4.
5.3.2. Formation d'oedème :
- Pas d'oedème : 0.
- Très léger oedème (à peine visible) : 1.
- Léger oedème (contours bien définis, gonflement apparent : 2. - OEdème moyen (épaisseur environ 1 mm) : 3.
- OEdème grave (épaisseur supérieure à 1 mm et surface supérieure à celle de la zone d'application) : 4.
6. Détermination de l'indice d'irritation primaire.
6.1. Additionner les chiffres obtenus pour l'érythème et pour l'oedème après vingt-quatre heures et soixante-douze heures, d'une part, sur les six zones non scarifiées, d'autre part, sur les six zones scarifiées.
6.2. Additionner les chiffres ainsi obtenus et calculer la moyenne en divisant le total par 24.
Cette moyenne représente l'indice d'irritation primaire cutanée (I.P.).
7. Expression des résultats.
Non irritant : IP supérieur ou égal à 0,5.
Légèrement irritant : IP supérieur à 0,5 et inférieur ou égal à 2. Irritant : IP supérieur à 2 et inférieur ou égal à 5.
Très irritant : IP supérieur à 5 et inférieur ou égal à 8.
Nota :
1. En cas d'impossibilité absolue d'utiliser la méthodologie décrite, l'expérimentateur devra mentionner avec précision et justifier dans son compte rendu les modifications apportées.
2. Les animaux morts en cours d'essai seront remplacés par d'autres animaux qui seront traités dans les mêmes conditions.